NuClean Plant Genomic DNA Kit
新型植物基因组DNA提取试剂盒(适用多糖多酚)
?398.00
CW0531S
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| 保存条件 | 运输条件 |
|---|---|
| RT(15-30℃) | 常温 |
不可以。
取约100 mg新鲜植物组织或20 mg干燥组织,用液氮充分研磨成粉末,避免反复冻融,否则可能导致DNA断裂或得率下降。
是正常的,立即混匀即可,沉淀不影响后续实验。
如果吸附膜呈现绿色,可向吸附柱中加入500 μL无水乙醇,离心1分钟,再进行后续步骤。
若下游实验对pH值或EDTA敏感,可采用灭菌水作为洗脱液。使用前需调节水的pH值至7.0-8.5(可用NaOH调节),pH值低于7.0会显著降低洗脱效率。如需长期保存洗脱产物,推荐使用Buffer GE,并于-20℃保存。
预防堵塞需充分研磨组织并确保转移上清时避免吸入沉淀。
(1) 样本起始投入量不要超过所用方法的起始量标准。
(2) 样品保存时要尽可能的避免反复冻融。
(3) 样本应进行充分裂解:确保组织在液氮中充分研磨,并充分涡旋混合。
(4) Buffer LP3和Buffer GW2中无水乙醇添加量不准确或漏加:应按照试剂瓶标签正确添加无水乙醇。
(5) 确保无乙醇残留:空离后将吸附柱开盖室温静置数分钟,彻底挥发乙醇。(6) 洗脱不充分: DNA 产物洗脱的时候,预热洗脱液并滴加在膜中央位置,尽可能的覆盖整个吸附膜,增加洗脱体积或者二次洗脱也可增加产量。
1. A260/A280比值低(<1.7)。原因:蛋白或乙醇残留导致污染。解决方法:
1) 确保裂解充分:使用前请检查Buffer LP1和Buffer LP2是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,于56℃水浴孵育至重新溶解。
2) 去除乙醇残留:吸附柱空离2分钟后将吸附柱开盖置于室温数分钟,以彻底晾干。
2. A260/A280比值高(>2.0)。原因:核酸降解。
解决方法:
1) 避免降解:使用新鲜样本,避免样本反复冻融。
2) 优化洗脱:若采用灭菌水作为洗脱液。使用前需调节水的pH值至7.0-8.5(可用NaOH调节)。
Wang K, Shi L, Liang X, et al. The gene TaWOX5 overcomes genotype dependency in wheat genetic transformation. Nat Plants. 2022, 10.1038/s41477-021-01085-8. PMID: 35027699. (IF:15.793)
Fang X, Feng X, Sun X, et al. Natural variation of MS2 confers male fertility and drives hybrid breeding in soybean. Plant Biotechnol J. 2023, 10.1111/pbi.14133. PMID: 37475199. (IF:13.8)
Gao R, Han T, Xun H, et al. MYB transcription factors GmMYBA2 and GmMYBR function in a feedback loop to control pigmentation of seed coat in soybean. J Exp Bot. 2021, 10.1093/jxb/erab152. PMID: 33825878. (IF:6.992)
Li Y, Shan X, Gao R, et al. MYB repressors and MBW activation complex collaborate to fine-tune flower coloration in Freesia hybrida. Commun Biol. 2020, 10.1038/s42003-020-01134-6. PMID: 32719499. (IF:6.268)
400-0688-426
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